Agar er en gelatin-aktig substans, fremstilt fra røde alger og brukes til en rekke formål. En av de vanligste bruksområdene er som en dyrking medium for bakterier. LB agar er næringsagar som har blitt kombinert med lysogeni buljong (LB). Det er en vanlig holdt feilslutning at LB står for Luria-Bertani. Men dens oppfinner, Giuseppe Bertani, sier i sitt notat "lysogeni ved Mid-Twentieth Century: P1, P2, og andre eksperimentelle Systems", som initialene var alltid ment å stå for lysogeni kjøttkraft, ikke hans navn, og at hans coresearcher Salvador Luria. LB-agar er allsidig og ganske enkel å lage.

Bruksanvisning

•  Plasser trypton, gjærekstrakt og salt i Erlenmeyer-kolbe.

•  Tilsett destillert eller deionisert vann og sir eller rist til å oppløse de fleste av de tørre ingrediensene.

Tilsett agar og fortsette å riste eller røre. Alle de agar vil ikke oppløses, men det er viktig at du får det meste av det inn i løsningen. Unngå store klumper av uoppløst agar bosetting i bunnen av flasken.

lukke åpningen i kolben med folie.

Plasser flasken i en autoklav-pose.

6. Hell ca 1 cm vann inn i beholderen.

•  Sett beholderen og kolben i autoklaven. Sett autoklaven for en flytende syklus og sterilisere i minst 20 minutter. Hvis du bruker en trykkoker for sterilisering, gå til trinn 8. Ellers hopper du til trinn 10.

Hvis du bruker en trykkoker, plassere en liten mengde vann i komfyren og plasserer flaska i vannet. Ikke forsøk å sterilisere mer enn 250 ml om gangen ved hjelp av denne metoden.

9. Ta trykkokeren til omtrent 20 psi og sterilisere i ca 30 minutter.

Ta kolben fra autoklav eller trykkoker, ta vare som kolben vil være ganske varmt.

Drei kolben forsiktig når sterilisering er fullført. Dette vil fordele agar mer jevnt gjennom hele løsningen.

Sett flasken på et egnet underlag og la den avkjøles litt. Hvis du har forberedt en L eller mer av medium, gi den en svak virvel hver 10 til 20 minutter. Du vil være i stand til å fortelle at mediet er tilstrekkelig avkjølt når du kan holde baksiden av fingrene mot kolben i ca 2 sekunder uten at det blir ubehagelig varmt å ta på. Vent ca 15 til 20 minutter før du prøver dette.

Plasser en petriskål på et flatt underlag. Løft forsiktig lokket ved en vinkel, slik at det meste av fatet er igjen dekket. Ikke løft lokket rett av tallerkenen.

Hell mediet fra kolben i petriskålen til fatet er omtrent halvfull.

Straks setter på lokket, og flytt platen til side og gå videre til neste til alle ønskede platene har blitt fylt. Platene vil fullføre sin størkning i ca 30 minutter.

Place de petriskåler i den sterile posen der de kom eller annet egnet, steril beholder hvis du ikke er inoculating dem med en gang. Forsegle container for å bevare fuktighet. Merke platene hvis ønskelig. Hvis du lagrer platene, bør de oppbevares ved en temperatur på ca 39 til 40 grader F.

Tips og advarsler

• Oppskriften kan skaleres opp eller ned, som ønsket. Bruk alltid en Erlenmeyerkolbe som er minst dobbelt så stor som den ferdige mengde medium man ønsker.
• Hvis man bruker en trykkoker, forberede bare 250 ml medium i Erlenmeyer-kolben ved gangen.
• I fravær av en autoklav eller trykkoker, plasser flasked medium i en ildfast gryte og varm den ved 350 grader Fahrenheit i én time. I løpet av denne tiden gi kolben en virvel hvert 20. minutt eller så å full oppløse agar. Denne metoden vil ødelegge eller inaktivere de fleste bakterier, men kan ikke være bevis mot visse arter som trives på varme.
• Hvis du ønsker å legge til antibiotika eller andre tilsetningsstoffer til mediet, gjør det etter den første avkjølingsperiode. Sørg for å virvle kolbe litt å innlemme additiv hele blandingen.
• Håndtere den oppvarmede agar med forsiktighet og alltid bruke varmebestandig, vanntett votter når du håndterer den. Hot agar kan forårsake alvorlige brannskader!
• Hold sterile petriskåler stengt inntil klar til å helle din medium for å unngå luftbåren forurensning.
• Hvis du har tenkt å legge antibiotika til mediet, gjør du det rett før strømme inn platene. Sørg for å beskytte disse platene fra lys, noe som kan forringe antibiotika og redusere effektiviteten.