Blokk-buffere brukes til å stabilisere proteiner i belagte Immunokjemiske analyser, og ifølge Immunokjemiske Technologies, redusere de støy i resultatene av individuelle analyser, øke sensitiviteten til analysen, øke effektiviteten og holdbarheten av de belagte platene og forbedre reproduserbarheten. Blokk-buffere inhiberer spesifikk binding etter at proteinene og antistoffer er bundet sammen og er absorbert på den belagte analyseplate under en ELISA (enzym-bundet immunosorbent analyse). Fordi ELISAer kan bygges på ulike måter, er det flere valg av blokkering buffere for å møte en tekniker individuelle behov.

Bruksanvisning

•  Velg blokkering buffer avhengig av hvilken type ELISA du skal utføre. Valg av buffer inkluderer: generelle blokkere (pattedyr protein stillas) for sandwich og antigen-down ELISAer; BB2 neptune blokkerer (ikke-pattedyr protein stillas) for menneske- og pattedyrarter ELISAer; BB3 synblocks (små, syntetiske molekylære stillasene) for høy styrke blokkerer ELISAer; og BB4 fosf fritt (små, syntetiske, fosfor-free molekylære stillasene) for høye, ikke-spesifikke enzym-merket konjugerte bindende ELISA. Den BB4 buffer blocker er spesielt nyttig i analyser som bruker alkalisk fosfatase, kjemisk behandlet eller glass reaksjons plater og i MicroFluidics, som rapportert av immun Technologies, et selskap som leverer alle relevante analyseutstyr.

•  Stumanalyseplaten med antigen (protein) eller antistoffet ved å helle oppløsningen på tvers av platene.

•  Sug (fjerne) beleggoppløsningen ved å vippe platen slik at det overskytende blir kastet inn i en separat beholder.

Pipetter 300 til 400 mikroliter av blokkeringsbuffer til hver brønn av analyseplaten ved hjelp av en pipette.

Inkuber løsninger for rundt tre timer eller over natten ved normale temperaturer (4 grader Celsius). Ifølge Cell Technology selskapet, vil den høyre blokken buffer bevare dine reagenser, som kan være verdifulle fordi de er kostbare og kan være en mangelvare.

6. Vask overflødig protein for å fjerne overskytende mengder, da dette kan redusere påvisning av target-antigenet, som rapportert av Pierce Net.

•  På dette tidspunkt er reaksjonen fullstendig og man bør ha en ferdig plate inneholdende den rette mengden av antistoff bundet til antigen, noe som vil gi konsistente resultater og redusere plate-til-plate-variasjon i store, sammenlignende analyser.

I tilfelle av en microarray, bruke en avansert blokkering løsning som Array Det er Block Det Buffer, som har blitt designet spesielt for å inaktivere eventuelle reaktive grupper som forblir etter en "print" av underlag på lysbilder som inneholder super-epoxy, super-amin og super-aldehyd og samtidig beholde skarpheten resulterende signal, hindrer fluorescens og legge til rette for reduksjon av støy. Dette reagenset har en holdbarhet på ett år dersom riktig lagret, er meget ren og er gitt som en klar-til-bruk-konsentrat.