Digidexo.com

Protokoll for en DAPI Stain

Protokoll for en DAPI Stain


DAPI står for den kjemiske 4'-6-diamidino-2-fenylindol, og brukes til å sette flekker på dobbelt-trådet DNA. Den sammensatte danner blå fluorescerende komplekser med kjerner av celler og så brukes vanligvis til å fremheve strukturen i cellene. Den type og tetthet av farging kan også identifisere døde eller døende celler.

Forbereder DAPI Solution

Den DAPI oppløsningen først må fortynnes til en arbeidsoppløsning. For eksempel må 10 mg av Invitrogen DAPI produktet blandes med 2 ml avionisert vann, og deretter fortynnet videre til 300 nano-molar konsentrasjon (retninger vil være til stede i produktet) med fosfatbufret saltvann (PBS).

Klar Sample

Løse prøven som passer til den type prøve som skal testes på et lysbilde. Legg 300 mikroliter av DAPI arbeidsløsning til prøven og inkuber i ett til fem minutter. Skyll lysbildet med PBS.

Analysere

Bruk en fluorescens mikroskop for å se på slide-montert prøven. DAPI-farget kjerner kan identifiseres ved en blå fluorescens.