Digidexo.com

Prinsipper for flowcytometrisystemer

Prinsipper for flowcytometrisystemer


Strømningscytometri kombinerer cellebiologi med studiet av lysbølger. Når en lysstråle reflekteres fra en partikkel, sprer lyset i to retninger. De vinkler fra spredte lys måles, og beregningene skape et bilde av objekter mellom 0.5um til 40um i diameter. Strømningscytometri beregninger brukes for å måle flere egenskaper av biologiske celler, inkludert størrelse, kornethet, cellereseptorer, og til og med biologiske aktiviteter, slik som DNA og RNA-replikasjon og-syntese.

Process

Flowcytometri teknikker starte med å ta en biopsi av celler og sende dem en etter en gjennom en stråle av lys i en cytometer. Ettersom cellene passerer gjennom strålen, blir lyset blir spredt og målinger av de vinkler ildfaste tatt. Den er utført i forbindelse med en fluorescerende mikroskop, som brukes til å evaluere komponenter i en celle gjennom lette utslipp av fluorescerende fargestoffer.

Flow Chamber

Hensikten med strømningskammeret er å fungere som en trakt for å sikre at celler blir levert til lysstrålen i en enkelt fil linje. Trakten fylles med en kappe fluid, og det er skjøvet gjennom trakten med de suspenderte celler. Trakten bredde er typisk 10 mikrometer, og fluidet blir skjøvet inn i en samlelinse som brukes til å spre lyset.

Light Source

Selv om de fleste laboratorier bruke en laser, andre lyskilder omfatter en buelampe eller LED. En buelampe er ikke i stand til å detektere fluorescens svakere, men det kan brukes sammen med teknologi som benytter sterke fluorescerende emittere, slik som DNA-analyse. Primært er lyskilden en argon-laser som avgir blått lys ved 488 nanometer.

Immunologi

Strømningscytometri er brukt til å måle en rekke tilstander i immunologi og infeksjon. Flowcytometri brukes i diagnostikk av HIV for både arvelige og ervervede former. Det er også brukt til å måle nivåer av hvite blodceller spredning i tilfeller av lymfom og karsinomer. I tillegg immunologi bruker flowcytometri for å måle resultatene av benmargstransplanterte pasienter.

DNA analyse

Strømningscytometri er brukt til å måle mengden av DNA i kjernen av cellen. Ved å måle DNA, kan den spesifikke fasen av cellesyklusen kan identifiseres. Flowcytometri kan også oppdage unormal antall kromosomer å identifisere genetiske sykdommer. DNA-analyse med flowcytometri blir også brukt til å detektere Barretts øsofagus.