Molekylærbiologi og bakteriologi bruk agarplater til kultur mikroorganismer som bakterier for eksperimentering. Agar er middelet som stivner eller geler, et flytende næringsmedium som kreves av mikroorganismen til å overleve og vokse. Når overført til en agar plate, bakteriene vokse inn i distinkte kolonier (hvis dyrket i lave konsentrasjoner) eller flekker (hvis dyrket i høye konsentrasjoner) og kan bli høstet for analyse. Biologer forberede agarskåler, som prosessen krever tilgang til laboratorium-grade reagenser og maskiner og en god forståelse av molekylærbiologi og sterile teknikker.

Bruksanvisning

•  Sett på riktig verneutstyr, inkludert hansker, en frakk og munnbind, og rense alle overflater. Arbeide ved siden av en Bunsen-brenner eller fortrinnsvis i et sterilt laminær strømningshette. Dette hindrer luftforurensning fra å falle i agar.

Fjern bunken med petriskåler fra emballasjen, men redde for nedpakking agarskålene. Merk den ytre overflaten av formen (ikke lokket) med typen agar og datoen for preparatet. Legge platene ut som et enkelt lag med lokkene fjernet for å gjøre fylling av agar enklere.

Bland bacto-trypton, gjærekstrakt og agarose sammen og deretter legge til natriumhydroksid (NaOH) løsning. Legg sterilt destillert vann for å oppnå 1 liter næringsmedium. Overføre denne løsning til en glassflaske med minst 1,5 l volum. Løst skru på lokket av flasken og etiketten datoen for forberedelse og navnet på media. Legg en stripe av autoklav tape på flasken og autoklav det i 25 minutter. La flasken avkjøles til ikke lavere enn 45 ° C (eller det vil stivne for tidlig), men ikke høyere enn 50 grader Celsius. Du kan lagre flasker med avkjølt og størknet agar ved 4 grader Celsius og deretter varme til flytende. Ved behov for spesielt eksperiment eller stamme av bakterier, legge til riktig type og mengde supplement som antibiotika. Hvis media er for varmt, vil de kosttilskudd bli ødelagt, så nøye kontrollere temperaturen i media før du fortsetter.

Hell et tilstrekkelig volum av agar til halv fylle fatet mens agar er fortsatt varm og flytende. Sørg for at overflaten er helt dekket. Ikke hell for mye eller la agar nå toppen av fatet. Hold platene i en steril atmosfære ved at bunsenbrenner eller laminær hette til å kjøre kontinuerlig. Tillate platene for å stille og deretter erstatte lokkene.

Tørk de agarplater i ca. 30 minutter til en time i en ovn innstilt som ikke er høyere enn 37 grader Celsius. Alternativt kan du la dem i laminær hette i tre minutter eller på en dekontamineres laboratoriebenken i en lav-trafikk område som ikke er trekkfulle for en dag eller to. Tørking platene stopper noen bakteriell løsning plassert på agar overflaten fra bare å fortynne ut og sklir av, i stedet for å danne kolonier som festes på agar.

lagre platene i mørket og ved 4 grader Celsius forsiktig. Stable tørkede agarplatene med sine bunner opp slik at du kan tydelig se etikettene og for å hindre mikroorganismer og rusk fra å falle på agar overflaten og forurenser dem. Sette retter tilbake i emballasjen, dekk med aluminiumsfolie og tape emballasjen lukket. Merke pakket plater med sitt innhold og dato for forberedelse. Du kan lagre platene i opptil to måneder og skal kaste dem etter det.

Tips og advarsler

• Opprettholde de høyeste standarder for sterilitet til enhver tid. Selv de minste mengder, for eksempel nanogram, av forurensninger eller uønskede bakterier vil resultere i ubrukelige plater.
• Vær forsiktig når du bruker en autoklav, slik det fungerer ved høye temperaturer og trykk. Feilaktig bruk kan resultere i kostbare skader eller personskader.
• Alle elementer skal være laboratorium-klasse for å hindre forurensning med sopp, bakterier eller annen uønsket rusk.