Mikroorganisme identifisering spiller en betydelig rolle i behandlingen av sykdom. Mikroskopisk undersøkelse av en farget smøre er vanligvis det første trinnet i å oppdage og identifisere sykdomsfremkallende bakterier. Selv om fremgangsmåten ikke foreta en endelig identifikasjon, gir den viktige spor vedrørende organismens størrelse, form og strukturelle sammensetning. Flekker er enten direkte eller indirekte. Når en direkte flekken er brukt, kan det være enten enkle eller differensial. Til tross for sine begrensninger, har direkte flekker mange fordeler.

Smear Forberedelse

Det første trinnet i direkte bakterie farvningsprosedyrer er utarbeidelse av en sverte. Celler fra en kultur eller prøven er spredt i en tynn film over et objektglass, tørket og løst ved hjelp av varme eller et kjemisk bindemiddel. Fixing smøre legger bakterier til raset og hindrer dem fra å bli vasket bort under farging prosedyren. Utstryk bør være tynn nok til å tillate observasjon av individuelle celler, og tilstrekkelig fast til å tillate gjentatte vaskinger under fargingsprosedyre.

Flekker

På grunn av deres høye vanninnhold, mikrober er nesten fargeløst. Farging forbedrer dem og avslører sine ulike egenskaper. Flekker er generelt salter består av ladde partikler, kalt ioner. Når det blandes med vann, dissosierer et salt til positivt ladede kationer og negativt ladede anioner. Flekker er salter som enten kationer eller anioner er farget. Avhengig av hvilken type ion bærer farge, vanlige mikrobiologiske flekker er enten basisk eller sur. Grunnleggende flekker inneholde fargede kationer og fargeløse anioner. Eksempler på basis flekker omfatter metylenblått, grunnleggende fuchsin og krystallfiolett. Surt flekker har farget anioner og fargeløse kationer. Eksempler er eosin, Kongo rød og nigrosin.

Prinsipp

Bakterier bære en svak netto negativ ladning. Følgelig, de tiltrekker og binder positivt ladede grunnleggende flekker. Fordi bakterier selv beholde fargestoff, er prosessen en direkte fargingsmetode. En direkte flekken kan være enten enkle eller differensial. Enkelt farging bruker en fargestoff for å avdekke størrelse, form og anordning av bakterier. En differensial flekken, slik som Gram-flekk, bruker to grunnleggende forskjellige fargede fargestoffer for å skille typer bakterier i tillegg til sine fysiske egenskaper. Indirekte, eller negativ fargeteknikker bruker sure flekker. Bakteriene frastøte fargestoff og forblir fargeløs mot flekken-beholde bakgrunn.

Fordeler

Direkte farging av bakterieceller er den mest brukte teknikken for å visualisere bakterier. Det er billig, enkel og forholdsvis raskt. Denne teknikken gir helsepersonell med samme dag resultater, et potensielt livreddende fordel når diagnostisering og behandling av noen infeksjoner, for eksempel bakteriell hjernehinnebetennelse. Direkte farget utstryk er permanente preparater som kan reexamined på et senere tidspunkt, hvis det er nødvendig. Fordi direkte farging dreper bakterier, er risikoen for smitte fra håndtering smøre redusert.