Digidexo.com

Slik utfører en Allium Cepa Test

Slik utfører en Allium Cepa Test


Løk (Allium Cepa) brukes til å vurdere miljøfarer ved at utviklings røtter for å komme i kontakt med stoffer som skal testes. Etter tilstrekkelig eksponering, blir rottene tatt av, farget og oppmalt, slik at cellekromosomer kan sees under et lysmikroskop. Toksisitet er dokumentert hvis kromosomfeil eller celledeling unormalt oppdages. Rotspissene blir brukt fordi cellene er det aktivt voksende og dele, noe som gir en god sjanse til å se kromosomer under forskjellige stadier av celledeling.

Bruksanvisning

Sette opp Test

•  Fjern den ytre tørr hud av 12 løk. Skrape bunnen av løken og rundt bunnplatene uten å skade det området hvor røttene vil oppstå.

Velg kanner som har en munn bred nok til å holde bunnen av løk nedsenket i test væsker. Fyll begrene med destillert vann og legg løken i begrene i kontakt med vannet. Skjerme sidene av begrene med aluminiumsfolie for å simulere jordiske mørke. Endre vann daglig.

Undersøk løk baser etter to dager. Røttene skal ha dannet. Evaluere rotvekst og kast de to løk med den svakeste rotvekst.

Sett opp en andre serie på fem begerglass som hver inneholdt en prøve av det materiale som skal testes, slik som avfallsvann eller industrielt avrenning. Sette fem av løk i disse begre. Beholde de andre fem i destillert vann som testkontroll. Tillate røttene å vokse i ytterligere 24 timer.

Utarbeidelse av Roots

Med en skalpell eller barberblad, høste fem på seks rotspissene fra hver løk, opptak som var kontrollene og som var forsøkspersoner. Hold røtter fra enkelt løk skille i små merket ampuller.

Fix rotspissene umiddelbart i aceto-alkohol i en 1: 3-forhold. Plasser rotspissene for en løk på et objektglass og oppbløtes dem i 1 N saltsyre, noe som er det samme som 1-molar saltsyre, ved 60 grader Celsius i tre minutter. Flekk macerated tips med Carbol fuksin beis, en blanding av fenol og basiske fuksin som binder seg til elementer i celleveggene, slik at de blir mer synlig under lysmikroskopi.

Legg til to prosent aceto-Orcein flekken i fire prosent eddiksyre. Dette fargene kromosomer. Rør med macerating stang. Påfør et dekkglass, trykke den ned for å ta knekken på de grunn tips. Enten forsegle kantene med hurtigtørkende neglelakk eller permanent montere forberedelsene i Canada balsam, harpiks fra balsam furua blandet med enten essensielle oljer eller xylen. Antall lysbildene slik at resultatene vil bli registrert, men ikke klart hvorvidt hver er en prøvekanin eller en kontroll.

Opptaksresultat

Plasser objektglass på scenen av et lysmikroskop. Undersøke feltet under lavere forstørrelse, bytte til høyere forstørrelser å undersøke kromosomene.

Noter kromosomavvik på et datablad, registrering av informasjon ved kodet nummer for hver løk. Inkluder ufullstendig separert eller ødelagte kromosomer, mikrokjerner (ekstra kjerner dannes nær slutten av celledeling som kan inneholde kromosom rusk), kromosomringer og klissete og forstyrret kromosomer i forskjellige stadier av celledeling. Fotografere hvert lysbilde.

Analyser data ved hjelp av statistisk analyse. Tolke resultatene til å vurdere hvorvidt testløsning er gentoksisk.