Insulin-lignende vekstfaktor-1 (IGF, IGF-1) er et biologisk aktivt hormon som ligner på insulin. IGF-1 har anabolsk aktivitet på et stort utvalg av celletyper, inkludert muskel, ben og brusk vev. Den brukes klinisk for å behandle kortvokste barn født små for gestasjonsalder. Utarbeidelse av en fungerende løsning fra tørket IGF er gitt for forskningsbruk.

Bruksanvisning

Se Ressurser under for en kobling til selskaper som tilbyr IGF-1 for forskning.
Skaffe 100 mikrogram (mcg) eller 1 milligram (mg) av tørket IGF-1 fra en pålitelig kilde.

Klargjør en eddiksyrearbeids oppløsning av 100 mM (0,575% eddiksyre). 100mM eddiksyre kan også kjøpes utvannet (se Ressurser).

Fra en 5% oppløsning (destillert hvit eddik eller fortynnet iseddik):
Fortynn 5% eddiksyre ved tilsetning av 4.6cc å 6.4cc sterilt vann, for å frembringe 2,3%.
Fortynn 2,3% oppløsning (1: 4) ved tilsetning av 1cc til 3cc sterilt vann, for å frembringe 0,575%.

Filter sterlize eddiksyreløsning (valgfritt).

Den 4cc av 100 mM (0,575% eddiksyre) kan være filtersterilisert for å minimalisere risikoen for bakterieforurensning. En sprøytefilter 13 mm plate eller mindre (0,2 mikron filter) er festet til den fullstendige sprøyten, og oppløsningen blir utvist sterlized av filteret.

Legg merke til at sprøytefilter har et hulromsvolum. Det vil si, hvis 1 ml blir lastet inn i en sprøyte, og føres gjennom et filter, vil mindre enn 1 ml komme ut. Dette kan gjøres rede ved å laste nok løsning for å fylle tomrommet, observere tapt volum, deretter dispensere ønsket volum. Alternativt kan løsningen bli etterfulgt av et volum (1-2cc) av luft for å tømme filteret.

Legg 1cc av 100 mM eddiksyre til det tørkede IGF-1.

Tørk / sterilisere toppen av IGF-1 hetteglass med spritservietter.
Rote nålen inn i IGF-1 hetteglass og tilsett 1cc av 100 mM (0,575% eddiksyre) eddiksyre til det tørkede IGF-1.
Lett hetteglasset for å rekonstituere pulveret.
Arbeidsoppløsningen som fremstilles er 100mcg / ml eller 1000mcg / ml, avhengig av mengden av IGF-1 (100mcg eller 1 mg) i hetteglasset.

Oppbevar rekonstituerte IGF-1.

IGF-1 er stabilt ved romtemperatur (seks måneder). Det kan lagres ved 4 ° C (kjøleskap) for langtidslagring (to år). Unngå flere fryse-tine sykluser og eksponering for hyppige temperaturendringer.

Tips og advarsler

• For volumer, er 1 milliliter (ml) tilsvarer en kubikkcentimeter (cm '). Molaritet på en 100% eddiksyreoppløsning = 17,4 molar. IGF-1 kan bli rekonstituert i sterilt vann for umiddelbar bruk. Bruk "sterilt vann for injeksjon" dersom løsningen vil bli testet in vivo. Tørket IGF-1 bør lagres ved -20 til 4 ° C, og er stabil i minst to år, eller seks måneder ved romtemperatur
• Vær forsiktig når du arbeider med konsentrerte eller fortynne syrer. De kan forårsake etseskader ved kontakt med hud, øyne eller slimhinner. Merk at Tercica sin Increlex er eneste leverandør av IGF-1 for kliniske applikasjoner i USA, alle andre IGF-1 er godkjent for forskningsbruk.