Digidexo.com

Permeabilization Protokoller

Permeabilization protokoller er relatert til fremgangsmåten for fremstilling av cellemembraner ved hjelp av gjennomtrengelige kjemiske stoffer for å få tilgang til cellens indre uten å ødelegge den. Disse protokollene er i hovedsak brukt i løpet av studien og analyse av komponenter og molekylær metabolismen av pattedyrceller og mikroorganismer som bakterier.

Permeabilization av bakterier med heksan

Denne protokollen er brukt i analysene av enzymet L-asparaginase, som finnes i visse bakterier slik som Escherichia coli, Enterobacter aerogenes og Pseudomonas aeruginosa. Ifølge protokollen nettet, bruker denne metoden en heksanløsningsmiddel (C6H14) i en vandig saltoppløsning for frigjøring av enzymet. Heksan er innhentet gjennom raffinering av råolje, har lav toksisitet og er regnet som en av de mest kostnadseffektive løsninger brukes i dag i permeabilization protokoller.

Innføring av peptider i hjertemuskelceller

Ifølge en artikkel publisert i American Heart Associations "Circulation Research," molekyler som kalles saponiner kan brukes i permeabilization av pattedyrcellemembraner. Denne fremgangsmåten brukes ved eksperimenter som involverer innføring av peptider --- store og normalt impermeable molekyler inn i --- neonatale kardiale celler, som kalles myocytter. Denne protokollen brukes til å studere PKC enzymer, som er involvert i regulering og frekvensen av sammentrekning i hjerteceller, blant andre funksjoner.

Formaldehyd og vaskemiddel

Den kjemiske forbindelsen formaldehyd, vaskemiddel Triton X-100 og opp til 50 prosent metanol alkohol (MeOH) blir brukt i en permeabilization protokoll for å studere blodlegemer, i henhold til en artikkel publisert på PubMed område. Denne fremgangsmåte blir vanligvis brukt for å identifisere molekyler som kalles fosfo-epitoper --- funnet i blod, nervesystemet, hud og andre celler --- fra andre intracellulære komponenter av fargedifferensiering.