Ribonukleinsyre eller RNA er en viktig genetisk komponent av celler, og er ofte ekstrahert og brukt av forskere for komplekse genetiske eksperimenter. Denne prosessen kalles RNA-isolering. En spesiell type RNA, mRNA representerer 1-5 prosent av det totale RNA i en celle, og er spesielt nyttig for forskere. Inntil nylig har det ikke vært mulig på effektiv måte å isolere mRNA fra prokaryote organismer som bakterier på grunn av bindingen teknologien som ble brukt. Men de siste teknologiske fremskritt har produsert lab kits som muliggjør høy avkastning isolering av bakteriell mRNA.

Bruksanvisning

Bakteriell celle avbrudd og mRNA Isolation

•  Velg den mest hensiktsmessige metoden for å forstyrre bakterieceller du isolere mRNA fra. Den beste metoden avhenger av cellene; for eksempel, hvis de er hardt du sannsynligvis ønsker å slipe cellematerialet veldig fint å bryte ned alle cellevegger. Sonic eller risting metodene fungerer godt for væsker eller halvfaste vev.

Plasser forstyrret cellematerialet i kontakt med en denaturerende løsning umiddelbart å begynne nedbryting og fjerning av genetisk materiale. Tid er kjernen her som genetisk materiale som DNA og RNA forfallet raskt. Enkelte typer av denaturerende løsninger fungerer best med forskjellige cellemateriale, og det er noen denaturerende oppløsninger som er spesielt utformet for å forhindre nedbrytning av genetisk materiale, slik man har lengre tid å utføre isolasjon.

Bruk bakteriell mRNA isolasjon kit å isolere mRNA i prøven. Med de fleste kits dette er en ganske enkel, brukervennlig prosess, og et par timer senere har du et utvalg av bakterielle mRNA klar til bruk i identifisering eller ytterligere eksperimenter.

Tips og advarsler

• Isolere bakteriell mRNA er en vanskelig teknisk prosedyre, og bør bare forsøkes av opplært personell i et fullt utstyrt genetikk lab.