Digidexo.com

Lentivirus Transfeksjon Protocol

Lentivirus Transfeksjon Protocol


Amerikanske og europeiske forskere brukt lentiviruses i et banebrytende klinisk studie som tar sikte på herding adrenoleukodystrophy (ALD), en dødelig hjernesykdom hos unge gutter som er forårsaket av en mutert ALD genet. Lentivirus leverte en riktig versjon av ALD genet til to unge pasienter og i 2009, forskere kunngjorde at de hadde stanset utviklingen av sykdommen.

Lentiviruses

Lentiviruses er retrovirus, siden deres genetiske informasjon finnes i RNA i stedet for DNA. De infisere humane celler og et spesielt enzym omdanner sin RNA til DNA, som integreres i det cellulære DNA. Cellene gjenskape disse genene, som gjør flere virus som infiserer andre celler.

Modifikasjoner

Forskere endret de lentiviruses. I stedet for å levere de virusgener til en celle, leverer den modifiserte lentivirus et terapeutisk gen som ALD. De plassert genene for de virale strukturelle proteiner i plasmider, som er små biter av DNA. En egen plasmid inneholder ALD genet.

Transfeksjon

Forskere produsere de modifiserte lentiviruses etter transfeksjon. De blande plasmider med salter eller lipider som gir plasmidene inn i celler hvor de er replikert. Cellene produserer de virale strukturelle proteiner som selv montere inn i viruspartikler, som hver inneholder en del av RNA med ALD-genet. Disse modifiserte partikler går ut av cellene i vekstmediet, hvor de blir samlet inn for bruk i genterapi forsøk.

Bruksområder

De virus er et populært verktøy for å modifisere celler for forskning og industrielle anvendelser, i tillegg til genterapi. For eksempel kan celler gjøres som uttrykker insulin for farmasøytisk produksjon eller grønt fluorescerende protein for sporing celler i migrasjonsstudier.