Hoechst flekker er fluorescerende fargestoffer som benyttes for merking av DNA og RNA ved fluorescens mikroskopi og strømningscytometri-teknikker. Hoechst 33258 og Hoechst 33342 er den mest brukte av disse flekkene. De har evnen til å binde seg til DNA-molekyler, noe som fører kjernene og mitokondrier skal vises fluorescerende under ultrafiolett lys. Protokoller for Hoechst flekker er vanlig praksis i bioteknologiske og genetikk laboratorier, og inkluderer cellefargeteknikker som bruker både Hoechst 33258 og Hoechst 33342.

Hoechst 33342 HSC Farging og Stem Cell Rensing Protocol

Denne protokollen blir brukt for å farge cellene fra mus benmarg. Teknikere fremstille benmargsprøve med HBSS + salt-løsning, HEPES-buffer og kalvefosterserum. De spinner løsningen og legge til en forvarmet DMEM medium. Hoechst flekken blir deretter tilsatt. Oppløsningen plasseres i en 98,6 grader Fahrenheit vannbad i nøyaktig 90 minutter, rapporterer Department of Immunology ved University of Pittsburgh. DNA-segmenter vises fluorescerende under en cytometer.

Hoechst 33342 DNA Farging

Under denne protokollen, teknikere suspendert Hoechst 33342 flekken i destillert vann, tilsett 2 prosent fetalt kalveserum til celleprøven, idet pH ble holdt ved 7,2 ved hjelp av en bufferoppløsning. Celler blir deretter inkubert ved 98,6 grader C i en time, og umiddelbart analysert med en del av utstyret som kalles cytometer.

Stained DNA er så synlig og fluoriserende, ifølge University of Michigan Health System.

DNA Detection Ved hjelp av den DNA-bindende fluorokrom Hoechst 33258

Dette protokoller brukt en del av utstyret som kalles spektrofotometer å analysere DNA og RNA segmenter. Teknikere bruker Hoechst 33258 arbeidsløsning og kalv thymus DNA-prøver. De gjør også en adskilt løsning ved hjelp av DNA-prøven og en kjemisk kalt ethidiumbromid. Senere, de sammenligner cellefarging resultater i både media, ved hjelp av et spektrofotometer, ifølge Current Protocols i Cytometry.