Digidexo.com

Tris-Tricin Protokoller

Tris-tricin er et hvitt krystallinsk pulver som benyttes i molekylærbiologiske laboratorier som en bufferoppløsning. Denne organiske forbindelsen er oppløselig i vann, har et lavt syrenivå og benyttes i vitenskapelige fremgangsmåter, slik som gel-elektroforese, for å balansere eller buffer av pH i løsninger som ble analysert. Tris-Tricin protokoller inkluderer SDS-PAGE i en Tris-tricin-buffer, Tris-tricin gel elektroforese og for separering av proteiner med lav molekylvekt.

SDS-PAGE i en Tris-tricin Buffer

Polyakrylamidgel-elektroforese med detergent natrium-dodecyl-sulfat er en mye brukt teknikk for småskala separasjon av proteiner, sier G. Brent Irvine, forsker ved Queens University i Belfast, i "Neuropeptide Protocols". Teknikere oppløse akrylamid i vann, holde løsningen på 39.2 grader Fahrenheit. Senere, legger de Tris-tricin, hydrogenklorid, mercaptoetanol og SDS å komponere gel. Molekylærbiologer kan brukes denne gelen i elektroforeseapparaturen, som er spesielt designet for å skille proteiner.

Tris-tricin Gel

Denne protokollen refererer til fremstillingen av Tris-tricin gel for anvendelse i de generelle elektroforese eksperimentene, ifølge University of Washington. Teknikere blande akrylamid-løsning, Tris-tricin, klor, SDS og dobbelt destillert vann. De deretter legge glycerol for å separere og fjerne gelen bare gassen laget i løsningen under vakuum i opp til 15 minutter. De legger ammoniumpersulfat og tetrametyletylendiamin og virvel å blande. Til slutt legger de vannmettet isobutylalkohol til gel.

Separering av lav molekylvekt Proteiner

Tris-tricin er en viktig komponent i separasjon av lavmolekylære proteiner, sier Ian M. Rosenberg i "Protein Analyse og rensing. Stasjonære Techniques" For å fremstille elektroforese Tris-tricin-løsning, teknikere legge TEMED, Coomassie blått fargestoff, den geler akrylamid og bisakrylamid, hydrogenklorid, glycerol og SDS. Den geldannelse prosessen er avsluttet innen en time. Proteinprøver inkuberes ved 104 grader Fahrenheit i 30 minutter, før elektroforese analyse.