Digidexo.com

Serologiske teknikker av Salmonella isolater

Serologiske teknikker av Salmonella isolater


Salmonella er en slekt av bakterier; enkelte underarter av denne slekten er vanlige skyldige i matforgiftning. Salmonella klassifisering er komplisert, ikke minst fordi ulike systemer av nomenklatur har blitt brukt tidligere. Generelt er det imidlertid, salmonella er vanligvis klassifiseres i en av to forskjellige arter, som er videre deles ved underarter og ved å serotype (også kalt serovar). Serologiske teknikker spille en nøkkelrolle i å klassifisere salmonella.

Identifikasjon

Antistoffer er Y-formede molekyler produsert av immunsystemet som er konstruert for å holde seg til høyst spesifikke mål. En gitt antistoff vil typisk binde til kun ett antigen eller målmolekyl. Forskere kan bruke denne egenskapen til å skille mellom forskjellige stammer av bakterier i samme slekt eller art. Metodene som brukes for å serotype bakteriene kalles serologiske teknikker; Det finnes flere forskjellige metoder i vanlig bruk.

Slide Agglutinasjon

Slide agglutinasjon er den enkleste test. En dråpe av bakterier suspendert i saltløsningen er plassert i to separate steder på et lysbilde, og antistoffer for et spesifikt antigen blir tilsatt til bare ett av de to områder. Dersom antigenet for antistoffet er til stede i prøven antistoffene vil binde seg til det; siden hvert antistoff er Y-formet og kan binde to antigener samtidig, bakterier og antistoffer blitt krysskoblet, og danner klumper som vanligvis er store nok til å være synlige for det blotte øye. Dersom antigen er fraværende, men eller er bare til stede i svært små mengder, vil ingen synlig forandring finne sted.

Tube Agglutinasjon

Tube agglutinering er lik skyve agglutinasjon, bortsett fra at fremgangsmåten utføres i et testrør (eller i flere reagensrør) for å bestemme om antigenet er tilstede. Antistoffer som er spesifikke for den bakterielle flageller (de lange pisk-lignende haler bakteriene bruker til å drive seg selv) vil vise en karakteristisk mønster av agglutinasjon der bakteriene blir bare løst klumpet seg sammen og kan rystes hverandre.

ELISA

Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) danner en kraftfull teknikk for raskt å identifisere bakterier fra en ukjent prøve ved deres antigener. Den doble antistoff-sandwich-analysen er den mest vanlige teknikk for salmonella. Først dannes antistoffer for et kjent antigen som er festet til veggene i brønnene i en mikrotiter-plate (en plate med flere små brønner eller beholdere for forskjellige prøver). Den ukjente antigen tilsettes, og brønnene ble deretter vasket for å fjerne eventuelt ubundet eller fritt-flytende antigen. Dersom antigenet matchet antistoffet, vil det bli tilbake når brønnene blir vasket. Deretter blir mer antistoffer lagt; Disse antistoffer er forskjellige, men i at de har et enzym (et protein som kan katalysere en reaksjon) knyttet til dem. Hvis antigenet var tilstede i prøven, og som kleber seg til antistoffer på veggene i brønnen, vil disse enzym-bundne antistoffer holde seg til antigenet. Til slutt blir en spesiell kjemisk tilsatt til brønnen. Hvis de enzym-bundne antistoffer er fremdeles der, vil enzymet endre test kjemisk, slik at den forandrer farge. Så dersom fargen på test kjemiske endringer, samsvarende antigenet var tilstede i prøven.

Typer

Det finnes mer enn 2000 forskjellige serotyper av salmonella. Bakteriene er gruppert i ulike serotyper ved hjelp av sine O-antigener og H antigener. Den O-antigen er et molekyl som utgjør en del av bakteriens cellevegg, mens H-antigenet er en del av flageller eller hale. To av de mest kjente serotyper er typhi og typhimurium; førstnevnte er ansvarlig for tyfoidfeber, mens den sistnevnte fører til matforgiftning. Serotypebestemmelse salmonella er en måte å fortelle de medisinsk skadelig subtyper av denne slekten fra hverandre.